血液单核白细胞/淋巴细胞分离试剂盒产品说明书

主要用途
血液单核白细胞/淋巴细胞分离试剂是一种旨在通过聚糖和泛影葡胺混合液，达到特定比重，然后离心分层以获得纯化完整的单核白细胞/淋巴细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。可以被用于单核白细胞/淋巴细胞的分离、鉴定、染色、标记、培养、DNA萃取、线粒体分离、细胞因子测定和细胞流式仪分析等研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，分离出色，性能稳定，细胞活性保证。

技术背景
全血溶液含有血清、各种蛋白因子、无核血红细胞、血小板、多核白细胞和单核白细胞等。为了获得纯化完整的单核白细胞/淋巴细胞，采用Boyum（1968）的比重（1.077克/毫升）离心技术，可以方便快速地从全血和骨髓中分离。

产品内容
分离液（Reagent A）         毫升
产品说明书                            1份

保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备
PBS缓冲溶液（G&VS12033）：用于清洗淋巴细胞
淋巴细胞完全培养液（G&VS12137.1）：用于分离后淋巴细胞的培养
白细胞冻存液（G&VS10001.2）：用于分离后淋巴细胞的长期保存
15毫升锥形离心管：用于细胞操作的容器
50毫升锥形离心管：用于细胞操作的容器
2毫升无菌塑料吸管：用于抽吸淋巴细胞层液体
台式离心机：用于沉淀细胞

实验步骤
实验开始前，室温预热分离液（Reagent A）。然后进行下列操作。
1．准备1个无菌的15毫升锥形离心管
2．加入xx毫升分离液（Reagent A）
3．小心沿着管壁，接近分离液层面，非常缓慢地加入5毫升新鲜的EDTA抗凝的全血样品在分离液（Reagent A）上面（注意：切记不要搅浑分离液（Reagent A））
4．小心放进台式离心机离心30分钟，速度为1500g（注意：建议离心机设置加速和制动均为零）
5．小心取出离心管，切记不要震动
6．可见：最上层为血浆（为淡红色通明），其次为薄薄的致密白色环状层（Buffy Coat），然后为离心液层，最后为红色沉淀在管底的红细胞层
7．小心抽掉白色环状层以上三分之二血浆液，切记不要搅动白色环状层
8．用2毫升无菌塑料吸管小心吸取白色环状层液体
9．移入到新的无菌的50毫升锥形离心管
10．加入48毫升用户自备的PBS缓冲溶液
11．轻柔上下倾倒混匀
12．放进台式离心机离心10分钟，速度为200g
13．小心倒掉上清液
14．用手指轻弹离心管2至3下，使白细胞颗粒群松动
15．（选择步骤）加入5毫升用户自备的淋巴细胞完全培养液，进行细胞培养
16．（选择步骤）或加入1毫升用户自备的白细胞冻存液，放进－80℃冻存
17．（选择步骤）或即刻进行各种后续实验（包括白细胞分离、鉴定、染色、标记、DNA萃取、线粒体分离、细胞因子测定和细胞流式仪分析等）

注意事项
1．本产品为10次操作（5毫升全血/次）
2．所有操作均须无菌状态下进行
3．操作时，须戴手套
4．操作时，在室温下进行
5．使用时，切莫污染母液
6．建议使用新鲜全血
7．全血样品采集须使用血液抗凝液 （参见订购信息）
8．如果血液出现凝块，不宜进行分离操作
9．全血样品和分离液（Reagent A）的使用比例为1：1，即1毫升全血，加1毫升分离液（Reagent A）；如需要增加或减少全血量，则按比例相应增加或减少分离液（Reagent A）
10．本产品细胞回收率70％以上，细胞存活率98％以上
11．本公司提供系列血液研究试剂产品
 
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定分离细胞活性保证

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
单组分订购信息
编号            名称            规格        
G&VS10038.2    血液单核白细胞/淋巴细胞分离试剂盒    10次
G&VS10038.2A    分离液（Reagent A）            毫升
G&VS12033     PBS缓冲溶液            毫升

试剂盒订购信息

产品编号            名称            规格
G&VS12031.1    血红细胞溶解液            500毫升
G&VS12031.2    陈旧血红细胞溶解液            500毫升
G&VS12031.3    血红细胞直接溶解液            500毫升
G&VS10031    EB病毒介导永生化淋巴细胞克隆试剂盒    10次
G&VS10038.1    血白细胞分离试剂盒            10次
G&VS10038.2    单核白细胞/淋巴细胞分离试剂盒        10次
G&VS10038.3    多核白细胞分离试剂盒        10次
G&VS10038.4    动物单核白细胞/淋巴细胞分离试剂盒    10次
G&VS10038.5    动物多核白细胞分离试剂盒        10次