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发根农杆菌C58C1化学感受态细胞

点击次数:39次     发布时间:2025/8/20 10:33:17

CAT#:JW-26-088
干冰运输、-80℃保存

发根农杆菌C58C1化学感受态细胞

产品及特点
本产品是由发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)C58C1菌株制备化学感受态细胞,可用于DNA转化。
发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(Agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。C58C1发根农杆菌菌株含有pRiA4b农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(蔷薇科,夹竹桃科,豆科,茄科,黄芩,烟草等),同时具有链霉素,利福平抗性。
本产品基因型是:
Agrobacterium rhizogenes (strR,rifR ) pRiA4b (agropine type)
本产品具有以下特点:
1.使用pCAMBIA2301质粒检测转化率>1×10E4 cfu/μg DNA。
2.本产品具有链霉素和利福平抗性。
3.本产品足够10次100mL的转化实验。
4.本产品只可用于科研。
规格及成分
本产品采用11孔盒包装
成分      
                  编号          规格              包装
发根农杆菌C58C1
化学感受态细胞    26-088a    100 μL×10    1.5mL本色管
使用手册       
       26-088sc    1 份                  

运输及保存
干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

自备物品
TY液体培养基

使用方法
1.1.取-80℃保存的C58C1发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每 100μl 感受态加入0.01-1μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3.冰浴中拿出放室温,加入700μl无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2小时。46000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的TY平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3天。
注意:
4.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
5.混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
6.平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。
7.C58C1具有链霉素、利福平抗性,不可用于具有链霉素抗性或利福平抗性质粒的转化。

关联产品
根癌农杆菌EHA105(pSoup)化学感受态细胞
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