CAT#:JW-26-053
干冰运输，-80℃保存

大肠杆菌TB1化学感受态细胞

产品及特点
本产品是大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）TB1菌株的化学感受态细胞，其基因型是F- ara Δ(lac-proAB)rpsL[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR。它具有下列特点：
1.本产品适合NEB公司的pMAL系列质粒原核蛋白表达，不能用于pET系列质粒的表达。
2.大肠杆菌TB1菌株具链霉素抗性（StrR）。
3.大肠杆菌TB1感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测，转化效率可达1E8 cfu/μg DNA。
4.本产品足够10次100μL的转化实验。
5.本产品只能用于科研。

规格及成分
本产品采用十二孔盒包装
成分                                            编号           规格                   包装
大肠杆菌TB1化学感受态细胞    26-053a    100 mL×10    1.5 mL压盖管
使用手册                                   26-053sc    1 份                       无

运输及保存
干冰运输，-80℃保存，有效期半年。

自备试剂
筛选培养基

使用方法
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μL感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加待转化的DNA溶液（质粒DNA或连接反应液），如果是纯化好的质粒DNA，可以加1ng，如果是连接反应液，可以加1-3μL。
3.用移液器轻轻吹打混匀后冰浴30分钟。
4.42℃热击45-60秒。此步对转化非常重要，时间长短也需要准确。
5.迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
6.每个离心管中加入1mL无菌的2YT或LB液体培养基（不含抗生素）混匀。
7.37℃摇床200rpm振荡培养60分钟使抗菌素基因表达。
8.取100μL涂盘到含有相应抗生素的2YT或LB固体培养皿上。剩下的900μL菌液可以放4℃，等转化结果出来后再处理。如果转化菌落数过少，可以将剩下的菌液离心弃800μL上清（培养基），用剩下的100μL培养基重悬细菌后再涂盘。
9.将平板平放于37℃直至液体被吸收（一般需要10分钟）。
10.倒置培养，37℃培养12-16小时。

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