小量 SPERFUSIN 脂质体细胞转染试剂盒
主要用途
小量 SPERFUSIN 脂质体细胞转染试剂是一种旨在通过高效低毒的多价阳离子脂质体介导载体, 与目标 DNA 或 RNA 的高效结合,产生稳定的转染复合物与细胞结合,将 DNA 释放入细胞内的权威而经 典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于质粒 DNA,RNA,寡聚核苷 酸等转入多种类型的贴壁和悬浮培养细胞系。可以被用于稳定转染或暂态转染。产品严格无菌, 即到即用, 无核酶污染,配比优化,操作简捷,性能稳定,转染效率明显。
技术背景
SPERFUSIN 极性基团带有 4 个正电荷的胺基团的脂质体介导载体,其基团具有与 DNA 或 RNA 的结合稳 定。同时, SPERFUSIN 内毒素和细胞毒性都非常之低,加上转染复合物能够高效地在完全培养基中形成, 因而整个转染过程可以在含血清而且是含有抗生素的培养基中操作,无需更换培养基。使用浓度更低。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
转染液(Reagent B) 微升
产品说明书 份
保存方式
保存在 4℃冰箱里,有效保证 6 月
用户自备
毫升离心管:用于转染液操作的容器
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024):用于细胞脱离
实验步骤
转染实验开始前,移取XX 微升 清理液(Reagent A) 到无菌的XX 毫升离心管,然后加入
10 微升 转染液(Reagent B),用XX 微升枪头轻轻上下抽吸混匀,成为转染工作液(注意: 参见注意事项10 中的“转染工作液”)。然后进行下列操作。
1 . 准备一个XX 孔细胞培养板的单孔细胞(XX 细胞/孔)
2 . 在转染前一天,用用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液脱离细胞一次
3 . 次日,细胞铺满率达XX%
4 . 移取XX微升 清理液(Reagent A) 到无菌的XX毫升离心管
5 . 加入XX 微升用户需转染的 DNA (XX微克),用XX 微升枪头轻轻上下抽吸混匀(注意: 参见注 意事项10 中的“DNA 混匀液”)
6 . 即刻一滴一滴加入 DNA 混匀物到转染工作液里
7 . 用XX微升枪头轻轻上下抽吸混匀
8 . 混匀后,在室温下静置XX分钟,期间轻轻混匀数次
9 . 同时小心抽掉细胞培养板里的培养液
10.(选择步骤)轻轻加入适量的 清理液(Reagent A) 到培养孔里(注意: 参见注意事项10 中的“孵育补充液”)
11.轻轻混匀含有 DNA 的转染工作液,即刻轻轻缓慢加入 200 微升到细胞培养孔里
12.放进XX℃细胞培养箱,孵育XX小时
13.小心抽掉含有 DNA 的转染工作液
14.加入XX微升用户自备的完全细胞培养液
15.放进XX℃细胞培养箱,孵育过夜
16.如果稳态表达,小心抽掉培养液,加入用户自备的筛选培养液
17.如果暂态表达,可以收集细胞后保存或即刻进行后续实验
注意事项
1 . 本产品为 10 次操作
2 . 整个操作须无菌操作
3 . 操作时使用的枪头须使用带滤芯的枪头
4 . 孵育时建议将培养板密封,以防转染工作液蒸发
5 . 更换液体时,须小心,以防细胞松动或脱落
6 . 转染孵育时间可达 24 小时, 但建议在 10 小时内
7 . 必要时,可增加转染后细胞恢复培养时间至 72 小时,然后再进行筛选
8 . 本产品可以转染各种类型的细胞株
9 . 本产品提供的成分配比优化
10 .本产品适合于各种细胞培养板的单孔操作,试剂用量如下:
培养板 转染工作液 DNA 混匀液 孵育补充液 操作总量
清 理 液(Reagent A) 转染液(Reagent B) 强化液(Reagent C) DNA 量 清 理液(Reagent A) 清 理液(Reagent A)
48 空板 (3 X 105 细胞/孔)
48 空板 (3 X 105 细胞/孔)
24 空板 (5 X 105 细胞/孔)
12 空板 (1 X 106 细胞/孔)
6 空板 (2 X 106细胞/孔)
35mm(2 X 106 细胞/孔)
25cm2XX 培养瓶 (3 X 106 细胞/孔)
11.如果转染不理想,可以适当调整转染液和 DNA 用量或考虑使用其它转染试剂
12.本公司提供系列转染试剂产品
质量标准
1 . 本产品经鉴定性能长期稳定
2 . 本产品经鉴定转染效率高
使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货 后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定, 保证说明书所述的使用效果。在货到后 30 天内若发现确属本产品的质量问题, 请立即以书面形式(实验报 告)与本公司联系, 并将该产品退回, 经检验确系产品质量所致, 本公司负责更换产品。如系使用者错误 操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK , RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号 名称 规格
G&VS10027 小量 SPERFUSIN 脂质体细胞转染试剂盒 10 次
G&VS10027A 清理液(Reagent A) 50 毫升
G&VS10027B 转染液(Reagent B) 100 微升
G&VS12024 胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液 100/500 毫升
产品编号 名称 规格
G&VS10025 大量 Lipofusin 脂质体细胞转染试剂盒 10 次/100 次
G&VS10026 小量 LipofusinX 脂质体细胞转染试剂盒 10 次
G&VS10027 小量 Sperfusin 脂质体细胞转染试剂盒 10 次
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