小量 LipofusinX  脂质体细胞转染试剂盒

主要用途
小量 LipofusinX 脂质体细胞转染试剂是一种旨在通过强烈的阳离子脂质体介导载体， 帮助小剂量 目标 DNA 轻易通过转染困难的细胞种类的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成 功实验证明的。其适用于质粒 DNA，RNA，寡聚核苷酸等转入多种类型的贴壁和悬浮培养细胞系。可以被 用于稳定转染或暂态转染。产品严格无菌，即到即用，无核酶污染，配比优化， 操作简捷，性能稳定，转 染效率明显。

技术背景
LipofusinX  为带有精胺基团强负电性的脂质体介导载体，其基团具有超强的穿膜能力，血清干扰因素无损 于携带外源性 DNA 、RNA 等高效进入细胞内。

产品内容
清理液(Reagent A)    毫升
转染液(Reagent B)    微升
强化液(Reagent C)    微升
产品说明书    1 份

保存方式
保存在 4℃冰箱里，有效保证 6 月

用户自备
1.5 毫升离心管：用于转染液操作的容器
细胞培养板(皿)：用于样品操作的容器
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024)：用于细胞脱离
细胞培养箱：用于样品孵育

实验步骤
转染实验开始前，移取 xx 微升 清理液(Reagent  A) 到无菌的 1.5 毫升离心管，然后加入 2 微 升 转染液(Reagent B)，再加入 xx 微升 强化液(Reagent C)，用 200 微升枪头轻轻 上下抽吸混匀， 室温下， 孵育 5 分钟， 成为 转染工作液 (注意： 建议在30  分钟内使用工作液)。 然后进行下列操作。
1 ．  准备一个 48 孔细胞培养板的单孔细胞(3 X 105细胞/孔)
2 ．  在转染前一天，用胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液脱离细胞一次
3 ．  次日，细胞铺满率达 90％
4 ．  移取 xx 微升 清理液(Reagent A) 到无菌的 1.5 毫升离心管
5 ．  加入 5 微升用户需转染的 DNA  (1微克)，用 200 微升枪头轻轻上下抽吸混匀
6 ．  即刻加入 DNA 混匀物到 转染工作液里，用200 微升枪头轻轻上下抽吸混匀
7 ．  混匀后，在室温下静置 20 分钟，期间轻轻混匀数次
8 ．  同时小心抽掉细胞培养板里的培养液
9 ．  轻轻加入 xx 微升 37℃预热的 清理液(Reagent A)
10．即刻小心抽掉 清理液(Reagent A)
11．重复实验步骤 9 和 10 一次
12．(选择步骤)轻轻加入适量的 清理液(Reagent  A) 到培养孔里(注意： 参见注意事项10 中的“孵育补充液”)
13．轻轻混匀含有 DNA 的转染工作液，即刻轻轻缓慢加入 200 微升到细胞培养孔里
14．放进 37℃细胞培养箱，孵育 24 小时
15．小心抽掉含有 DNA 的转染工作液
16．加入 500 微升用户自备的完全细胞培养液
17．放进 37℃细胞培养箱，孵育过夜
18．如果稳态表达，小心抽掉培养液，加入用户自备的筛选培养液
19．如果暂态表达，可以收集细胞后保存或即刻进行后续实验

注意事项
1 ．  本产品为 10 次操作
2 ．  整个操作须无菌操作
3 ．  操作时使用的枪头须使用带滤芯的枪头
4 ．  孵育时建议将培养板密封，以防转染工作液蒸发
5 ．  更换液体时，须小心，以防细胞松动或脱落
6 ．  转染孵育时间可以 4 至 48 小时不等，但建议 24 小时
7 ．  必要时，可增加转染后细胞恢复培养时间至 72 小时，然后再进行筛选
8 ．  本产品可以转染各种类型的细胞株
9 ．  本产品提供的成分配比优化
10 ．本产品适合于各种细胞培养板的单孔操作，试剂用量如下：

培养板        转染工作液        DNA 混匀液        孵育补充液        操作总量
    清 理 液(Reagent A)    转染液(Reagent B)    强化液(Reagent C)    DNA 量    清理液(Reagent A)    清理液(Reagent A)    
96 孔板(1 X 105 细胞/孔)     微升    微升    微升    微克/5 微升    微升    0    微升
48 孔板(3 X 105 细胞/孔)     微升    微升    微升    微克/5 微升    微升    0    微升
24 孔板(5 X 105 细胞/孔)     微升    微升    微升    微克/5 微升    微升    微升    微升
12 孔板(1 X 106 细胞/孔)      微升    =微升    微升    微克/5 微升    微升    微升    微升                        
6 孔板(2 X 106 细胞/孔)         微升    微升    微升    微克/10 微升    微升    微升    微升
35mm(2 X 106细胞)               微升    微升    微升    微克/10 微升    微升    微升    微升
25cm2培养瓶(3 X 106细胞)    微升    微升    微升    微克/10 微升    微升    毫升    毫升

11．如果转染不理想，可以适当调整转染液、强化液和 DNA 用量或考虑使用其它转染试剂
12．本公司提供系列转染试剂产品

质量标准
1 ．  本产品经鉴定性能稳定
2 ．  本产品经鉴定转染效率高

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货 后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定， 保证说明书所述的使用效果。在货到后 30 天内若发现确属本产品的质量问题， 请立即以书面形式(实验报 告)与本公司联系， 并将该产品退回， 经检验确系产品质量所致， 本公司负责更换产品。如系使用者错误 操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK ，  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
编号        名称                规格
G&VS10026    小量 lipofusinX 脂质体细胞转染试剂盒    10 次
G&VS10026A    清理液(Reagent A)            50 毫升
G&VS10026B    转染液(Reagent B)            100 微升
G&VS10026C    强化液(Reagent C)            1 毫升
G&VS12024    胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液        100/500 毫升

产品编号        名称                规格
G&VS10025    大量 Lipofusin 脂质体细胞转染试剂盒    10 次/100 次
G&VS10026    小量 LipofusinX 脂质体细胞转染试剂盒    10 次
G&VS10027    小量 Sperfusin 脂质体细胞转染试剂盒    10 次
G&VS10028    QuikFusin 非脂质体细胞转染试剂盒    10 次/100 次
G&VS60036    重组腺病毒载体转染试剂盒        10 次
G&VS60037    重组逆转录病毒感染试剂盒        20 次
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