小量LipofusinX 脂质体细胞转染试剂盒

主要用途
小量LipofusinX脂质体细胞转染试剂是一种旨在通过强烈的阳离子脂质体介导载体，帮助小剂量目标DNA轻易通过转染困难的细胞种类的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于质粒DNA、RNA、寡聚核苷酸等转入多种类型的贴壁和悬浮培养细胞系。可以被用于稳定转染或暂态转染。产品严格无菌，即到即用，无核酶污染，配比优化，操作简捷，性能稳定，转染效率明显。

技术背景
LipofusinX为带有精胺基团强负电性的脂质体介导载体，其基团具有超强的穿膜能力，血清干扰因素无损于携带外源性DNA、RNA等高效进入细胞内。
 
产品内容
清理液（Reagent A）        毫升
转染液（Reagent B）        微升
强化液（Reagent C）        微升
产品说明书          1份

保存方式
保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备
1.5毫升离心管：用于转染液操作的容器
细胞培养板（皿）：用于样品操作的容器
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离
细胞培养箱：用于样品孵育

实验步骤
转染实验开始前，移取xx微升清理液（Reagent A）到无菌的1.5毫升离心管，然后加入xx微升转染液（Reagent B），再加入xx微升强化液（Reagent C），用200微升枪头轻轻上下抽吸混匀，室温下，孵育5分钟，成为转染工作液（注意：建议在30分钟内使用工作液）。然后进行下列操作。
1．准备一个48孔细胞培养板的单孔细胞（3 X 105细胞/孔）
2．在转染前一天，用胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液脱离细胞一次
3．次日，细胞铺满率达90％
4．移取xx微升清理液（Reagent A）到无菌的1.5毫升离心管
5．加入5微升用户需转染的DNA（1微克），用200微升枪头轻轻上下抽吸混匀
6．即刻加入DNA混匀物到转染工作液里，用200微升枪头轻轻上下抽吸混匀
7．混匀后，在室温下静置20分钟，期间轻轻混匀数次
8．同时小心抽掉细胞培养板里的培养液
9．轻轻加入xx微升37℃预热的清理液（Reagent A）
10．即刻小心抽掉清理液（Reagent A）
11．重复实验步骤9和10一次
12．（选择步骤）轻轻加入适量的清理液（Reagent A）到培养孔里（注意：参见注意事项10中的“孵育补充液”）
13．轻轻混匀含有DNA的转染工作液，即刻轻轻缓慢加入200微升到细胞培养孔里
14．放进37℃细胞培养箱，孵育24小时
15．小心抽掉含有DNA的转染工作液
16．加入500微升用户自备的完全细胞培养液
17．放进37℃细胞培养箱，孵育过夜
18．如果稳态表达，小心抽掉培养液，加入用户自备的筛选培养液
19．如果暂态表达，可以收集细胞后保存或即刻进行后续实验

注意事项
1．本产品为10次操作
2．整个操作须无菌操作
3．操作时使用的枪头须使用带滤芯的枪头
4．孵育时建议将培养板密封，以防转染工作液蒸发
5．更换液体时，须小心，以防细胞松动或脱落
6．转染孵育时间可以4至48小时不等，但建议24小时
7．必要时，可增加转染后细胞恢复培养时间至72小时，然后再进行筛选
8．本产品可以转染各种类型的细胞株
9．本产品提供的成分配比优化
10．本产品适合于各种细胞培养板的单孔操作，试剂用量如下：
11．如果转染不理想，可以适当调整转染液、强化液和DNA用量或考虑使用其它转染试剂
12．本公司提供系列转染试剂产品
 
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定转染效率高

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后30天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
单组分订购信息
编号        名称                规格    
G&VS10026    小量lipofusinX脂质体细胞转染试剂盒    10次
G&VS10026A     清理液（Reagent A）            毫升
G&VS10026B     转染液（Reagent B）            微升
G&VS10026C     强化液（Reagent C）            毫升
G&VS12024    胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液        毫升

试剂盒订购信息
产品编号        名称                规格
G&VS10025    大量Lipofusin脂质体细胞转染试剂盒    10次/100次
G&VS10026    小量LipofusinX脂质体细胞转染试剂盒    10次
G&VS10027    小量Sperfusin脂质体细胞转染试剂盒    10次
G&VS10028    QuikFusin非脂质体细胞转染试剂盒    10次/100次
G&VS60036    重组腺病毒载体转染试剂盒        10次
G&VS60037    重组逆转录病毒感染试剂盒        20次
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