CAT#:JW-26-036
干冰运输、-80℃保存

大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞

产品及特点
本产品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达1×10E7。BL21(DE3)菌株适合表达非毒性蛋白。该感受态细胞用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子，该区域整合于BL21的染色体上。
菌株基因型是：F -ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm (DE3)
本产品具有以下特点：
1.使用pUC19质粒检测转化率＞1×10E7 cfu/μg DNA
2.本产品足够10次100 mL的转化实验。
3.本产品只可用于科研。

规格及成分
本产品采用12孔盒包装
成分                                编号            规格        包装
大肠杆菌BL21(DE3)
化学感受态细胞            26-036    100 μL×10    1.5mL压盖管
使用手册                      26-036sc    1 份               无

运输及保存
干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备物品
LB培养基

使用方法
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μL感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加待转化的DNA溶液（质粒DNA或连接反应液），如果是纯化好的质粒DNA，可以加1ng，如果是连接反应液，可以加1-3μL。
3.用移液器轻轻吹打混匀后冰浴30分钟。
4.42℃热击45-60秒。此步对转化非常重要，时间长短也需要准确。
5.迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
6.每个离心管中加入1mL 无菌的LB液体培养基（不含抗生素）混匀。
7.37℃摇床200 rpm 振荡培养60分钟使抗菌素基因表达。
8.取100μL涂盘到含有跟质粒抗菌素基因对应的抗生素的LB固体培养皿上。剩下的900μL菌液可以放4℃，等转化结果出来后再处理。如果转化菌落数过少，可以将剩下的菌液离心弃800μL上清（培养基），用剩下的100μL培养基重悬细菌后再涂盘。
9.将平板平放于37℃直至液体被吸收（一般需要10分钟）。
10.倒置培养，37℃培养12-16小时。

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