细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书

主要用途
细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM  IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流 式仪测定细胞中 DNA 结合碘化丙啶染料程度， 来定量 DNA 含量， 以进一步获取细胞周期分布状况的权威 而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞(动物、人体、 植物、昆虫等)的细胞周期分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、细胞分裂、代谢等的研究。产品严格 无菌，即到即用，分辨率高，操作简捷，性能稳定。

技术背景
细胞周期是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标。通过 DNA  结合染料，借助细胞流式仪，测定出 DNA 含量，根据 DNA 含量随着细胞周期的不同而发生变化，来确定和区别细胞周期的不同阶段。流式细 胞术(FLOW CYTOMETRY) 是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学 为一体的高科学技术。凋亡细胞是在正常 G0/G1 峰细胞群前出现亚二倍体峰(sub－G1)细胞群。

产品内容
清理液(Reagent A)    xx 毫升
固着液(Reagent B)    xx 毫升
缓冲液(Reagent C)    xx 毫升
染色液(Reagent D)    xx 毫升
产品说明书    1 份

保存方法
保存 缓冲液(Reagent C)和 染色液(Reagent D)在－20℃冰箱里，其余的保存在 4 ℃冰箱里； 染色液(Reagent D) 避免光照，有效保证 12 月

用户自备
HANKS 平衡盐溶液(G&VS12022)或 PBS 缓冲溶液(G&VS12033)：用于清洗细胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(G&VS12024)：用于细胞脱离
完全细胞培养液(G&VS12052)：用于中和胰蛋白酶的处理
xx 毫升锥形离心管：用于细胞收集的操作
xx 毫升离心管：用于细胞染色的容器
(微型)台式离心机：用于细胞收集的操作
细胞流式仪：用于细胞荧光分析

实验步骤
实验开始前， 将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。移出 xx 微升 缓冲液(Reagent C) 到新的 xx 毫升离心管， 加入 xx 微升 染色液(Reagent D) 混匀后标记为 染色工 作液，置于暗室里，避免光照。然后进行下列操作。
1 ．  准备 1 瓶 25cm2细胞培养瓶的待测细胞，铺满率达 70％(约 1 百万细胞数)
2 ．  小心移出细胞培养液到 15 毫升锥形离心管(收集漂浮细胞)
3 ．  加入 xx 毫升用户自备的 HANKS 平衡盐溶液或 PBS 缓冲溶液到细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面
4 ．  小心移出 xx 毫升清洗液到上述 15 毫升锥形离心管
5 ．  加入 1 毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到细胞培养瓶，铺满整个培养平面
6 ．  置入 37℃培养箱孵育 1 分种
7 ．  振动培养瓶，使细胞脱落，然后加入 xx 毫升用户自备的完全细胞培养液
8 ．  移入到上述 xx 毫升锥形离心管(悬浮细胞从这一步骤开始)
9 ．  放进台式离心机离心 5 分钟，速度为 300g
10．小心抽去上清液
11．加入 xx 毫升预冷的 清理液(Reagent A) 到 15 毫升锥形离心管，混匀
12．移入到 1.5 毫升离心管
13．放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 500g  (或 2000RPM，例如 EPPENDORF 5415)
14．小心抽去上清液
15．加入 xx 毫升预冷的 固着液(Reagent B) 到 15 毫升锥形离心管，混匀
16．放进 4℃冰箱里孵育 16 小时
17．放进 4℃微型台式离心机离心 5 分钟，速度为 500g  (或 2000RPM，例如 EPPENDORF 5415)
18．小心抽去固着液
19．加入 xx 微升 染色工作液，用 200 微升枪头上下轻柔抽吸，混匀细胞颗粒群
20．在暗室里 37℃培养箱里孵育 45 分钟
21．移入到细胞流式仪专用测试管(可放进 4℃冰箱里待测)
22．即刻进行细胞流式仪分析： 波长 488nm 氩离子激光出现红色荧光(或 488nm 激发波长，610nm 散发波 长)，观察 50000 个细胞以上

注意事项
1 ．  本产品为 100 次操作
2 ．  确保实验准确性，须收集所有悬浮和贴壁细胞
3 ．  可用 35mm 培养皿或 6 孔培养板，细胞总量不得少于 30 万
4 ．  操作时，须戴手套
5 ．  孵育时，必须避免光照
6 ．  建议细胞染色完成后，即刻进行细胞流式仪分析。如果放进 4℃冰箱里待测，不要超过 1 周
7 ．  细胞流式仪分析前，须混匀内容物，避免细胞成团
8 ．  细胞检测量不得少于 10000 个
9 ．  告知流式仪技术员有关细胞类型
10．本公司提供系列细胞周期分析试剂产品

质量标准
1 ．  本产品经鉴定性能稳定
2 ．  本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后， 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式(实验报告) 与本公司联系，并将该产品退回， 经检验确系产品质量所致， 本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK ，  RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
编号            名称                规格
G&VS10021.3    细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒    100 次
G&VS10021.3A    清理液(Reagent A)                500 毫升
G&VS10021.3B    固着液(Reagent B)                500 毫升
G&VS10021.3C    缓冲液(Reagent C)                100 毫升
G&VS10021.3D    染色液(Reagent D)                10 毫升
G&VS12022    HANKS 平衡盐缓冲溶液            500 毫升
G&VS12024    胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液            100 毫升
G&VS12033    PBS 缓冲溶液                500 毫升
G&VS12052    DMEM 完全细胞培养液            500 毫升

产品编号            名称                规格
G&VS10021. 1    通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒        100 次
G&VS10021.2    细胞周期蓝色荧光流式细胞分析试剂盒(紫外波长，无需固定和透膜处理)    100 次
G&VS10021.3    细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE) 红色荧光流式细胞分析试剂盒    100 次
G&VS10137. 1    双参数细胞周期 G0 期流式细胞分析试剂盒            10 次
G&VS10137.2    双参数细胞周期 G1 期流式细胞分析试剂盒            10 次
G&VS10137.3    双参数细胞周期 S 期流式细胞分析试剂盒            10 次
G&VS10137.4    双参数细胞周期 G2 期流式细胞分析试剂盒            10 次
G&VS10137.5    双参数细胞周期 M 期流式细胞分析试剂盒            10 次
G&VS10137.6    多参数细胞周期全周期流式细胞分析试剂盒            10 次
G&VS10138. 1    通用型动物细胞周期(G1/S 和 G2/M 期) 同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒    10 次
G&VS10138.2    动物细胞周期 G0 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10138.3    动物细胞周期 G1 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10138.4    动物细胞周期 G1 后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒        10 次
G&VS10138.5    动物细胞周期 S 早期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10138.6    动物细胞周期 S 期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒        10 次
G&VS10138.7    动物细胞周期 S 后期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10138.8    动物细胞周期 G2 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10138.9    动物细胞周期 M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10140. 1    通用型植物样品细胞周期 G1/S 和G2/M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒    10 次
G&VS10140.2    植物细胞周期 G0 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10140.3    植物细胞周期 G1 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10140.4    植物细胞周期 G1 后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒        10 次
G&VS10140.5    植物细胞周期 S 早期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10140.6    植物细胞周期 S 期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒        10 次
G&VS10140.7    植物细胞周期 S 后期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10140.8    植物细胞周期 G2 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10140.9    植物细胞周期 M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10141. 1    通用型酵母样品细胞周期 G1/S 和G2/M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒    10 次
G&VS10141.2    酵母细胞周期 G0 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10141.3    酵母细胞周期 G1 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10141.4    酵母细胞周期 G1 后期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒        10 次
G&VS10141.5    酵母细胞周期 S 早期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10141.6    酵母细胞周期 S 期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒        10 次
G&VS10141.7    酵母细胞周期 S 后期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10141.8    酵母细胞周期 G2 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10141.9    酵母细胞周期 M 期同步(SYNCHRONY) 处理试剂盒        10 次
G&VS10142    通用型细胞周期同步(SYNCHRONY)细胞流式分析试剂盒        20 次