真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书

主要用途
真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流式仪测定真菌/酵母细胞中DNA结合碘化丙啶染料程度，来定量DNA含量，以进一步获取细胞周期分布状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌/酵母细胞，包括芽殖酵母、裂殖酵母等的细胞周期分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、细胞分裂、代谢等的研究。产品严格无菌，即到即用，分辨率高，操作简捷，性能稳定。

技术背景
芽殖酵母（Saccharomyces cerevisiae）、裂殖酵母（Schizosacchromyces pombe）是研究真核生物细胞周期的模式生物。细胞周期是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标。通过DNA结合染料，借助细胞流式仪，测定出DNA含量，根据DNA含量随着细胞周期的不同而发生变化，来确定和区别细胞周期的不同阶段。流式细胞术（FLOW CYTOMETRY）是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。凋亡细胞是在正常G0/G1峰细胞群前出现亚二倍体峰（sub-G1）细胞群。

产品内容
清理液（Reagent A）        毫升
固着液（Reagent B）        毫升
抗干扰液（Reagent C）    毫升
酶解液（Reagent D）    毫升
染色液（Reagent E）        毫升
产品说明书        1份

保存方法
保存抗干扰液（Reagent C）、酶解液（Reagent D）和染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent E）避免光照，有效保证6月

用户自备
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
2毫升离心管：用于细胞染色的容器
（微型）台式离心机：用于样品操作操作
培养箱或恒温水槽：用于反应孵育
细胞流式仪：用于细胞荧光分析

实验步骤
1．准备好5 X 106的待测真菌/酵母细胞
2．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g
3．小心抽去上清液
4．加入xx毫升清理液（Reagent A）到15毫升锥形离心管，混匀
5．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g
6．小心抽去上清液
7．缓慢加入xx毫升预冷的固着液（Reagent B），且涡旋震荡混匀
8．放进4℃冰箱里孵育16小时
9．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g
10．小心抽去固着液
11．加入xx毫升清理液（Reagent A）到15毫升锥形离心管，混匀
12．移入到2毫升离心管
13．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g
14．重复清洗一次
15．加入xx微升抗干扰液（Reagent C），混匀
16．放进37℃恒温水槽，孵育2至16小时
17．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g
18．加入xx微升酶解液（Reagent D），混匀
19．放进37℃恒温水槽，孵育20分钟
20．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g
21．加入xx微升清理液（Reagent A），混匀
22．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为16000g
23．小心抽去上清液
24．加入xx微升染色液（Reagent D），混匀细胞颗粒群
25．超声处理100瓦，30%功率，15秒
26．在暗室里37℃培养箱里孵育30分钟
27．移入到细胞流式仪专用测试管（可放进4℃冰箱里待测）
28．即刻进行细胞流式仪分析：波长488nm氩离子激光出现红色荧光（或488nm激发波长，610nm散发波长），观察50000个细胞以上
 
注意事项
1．本产品为50次操作
2．操作时，须戴手套
3．孵育时，必须避免光照
4．建议细胞染色完成后，即刻进行细胞流式仪分析。如果放进4℃冰箱里待测，不要超过1周
5．细胞流式仪分析前，须混匀内容物，或超声处理，避免细胞成团
6．细胞检测量不得少于10000个
7．告知流式仪技术员有关细胞类型
8．使用未经染色的细胞进行FSC与SSC设定，然后将染色细胞调整到未经染色细胞的水平，包括FL1、FL2、FL3的PMT
9．建议设定：
Detector FSC E00  Gain：3
Detector FL2-A Voltage：890  Gain：2
流速：500/秒
10．本公司提供系列细胞周期分析试剂产品
 
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
单组分订购信息
编号            名称                    规格    
G&VS10021.4    真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒    50次    
G&VS10021.4A    清理液（Reagent A）                    毫升
G&VS10021.4B    固着液（Reagent B）                    毫升
G&VS10021.4C     抗干扰液（Reagent C）                毫升
G&VS10021.4D     酶解液（Reagent D）                毫升
G&VS10021.4E     染色液（Reagent E）                    毫升

试剂盒订购信息
产品编号            名称                    规格
G&VS10021.1    通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒            100次
G&VS10021.2    细胞周期蓝色荧光流式细胞分析试剂盒（紫外波长，无需固定和透膜处理）    100次
G&VS10021.3    细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂盒    100次
G&VS10021.4    真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂盒    50次
G&VS10021.5    真菌/酵母细胞样品细胞周期SYTOX绿色荧光流式细胞分析试剂盒    50次