冰冻切片线粒体形态/活性荧光染色试剂盒产品说明书

主要用途
冰冻切片线粒体形态/活性荧光染色试剂是一种旨在通过长波长的荧光染料特异性地聚集在线粒体，并呈现红色，用于分析和观察线粒体活性与形态以及双重染色或重叠染色定位的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种冰冻切片组织（动物、人体、昆虫等）线粒体的形态观察、活性探测和定位标记。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定，滞留持久。

技术背景
线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体大量存在于代谢旺盛的细胞中，如动物的心肌，肝，肾等器官和组织的细胞中。大量制备线粒体就是从这些器官组织中提取，或从组织培养细胞中提取。在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。线粒体荧光探针MitoTracker RED，是一种含有硫醇（Thiol）氯甲基基团的荧光染料，自由通过细胞膜，选择性地聚集在线粒体。它可以对活细胞进行直接染色，在580nm波长可以清晰看到被染成红色的线状或颗粒小体的线粒体。并可以分析线粒体膜电位，以检测线粒体活性。

产品内容
清理液（Reagent A）        毫升
固着液（Reagent B）        毫升
预备液（Reagent C）        毫升
染色液（Reagent D）    微升
产品说明书        1份

保存方式
保存染色液（Reagent D）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备
培养箱：用于染色孵育
（共聚焦）荧光显微镜：用于组织细胞荧光分析

实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent D）置入冰槽里融化，然后分别移出xx微升预备液（Reagent C）和xx微升染色液（Reagent D）到新的1.5毫升离心管，标记为染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。
1．准备待测的厚为10微米的未经固着处理的冰冻切片
2．小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖切片表面
3．小心移去切片上的清理液（Reagent A）
4．小心加上xx微升固着液（Reagent B），覆盖切片表面
5．室温下孵育10分钟
6．小心移去切片上的固着液（Reagent B）
7．小心加上xx微升清理液（Reagent A），覆盖切片表面
8．小心移去切片上的清理液（Reagent A）
9．小心加上xx微升含有预备液（Reagent C）和染色液（Reagent D）的染色工作液到切片上，覆盖切片表面
10．放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟
11．小心移去切片上的染色工作液
12．小心加上xx微升新鲜的清理液（Reagent A）
13．小心移去清理液（Reagent A）
14．盖上盖玻片
15．即刻在荧光显微镜下进行观察：激发波长579nm，散发波长599nm（线粒体呈现红色）

注意事项
1．本产品为50次操作
2．操作时，避免污染母液
3．操作时，须戴手套
4．染色前，所有试剂溶液（除染色液外）需37℃预热
5．建议组织细胞染色完成后，即刻进行荧光检测分析
6．孵育时，必须避免光照
7．根据不同组织细胞类型，调整染色工作液的使用浓度，避免过度染色
8．本产品友好使用于双重染色或重叠染色
9．本公司提供系列线粒体分析试剂产品

质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
单组分订购信息
编号            名称                规格        
G&VS10019.5    冰冻切片线粒体形态/活性荧光染色试剂盒        50次
G&VS10019.5A    清理液（Reagent A）                毫升
G&VS10019.5B     固着液（Reagent B）                毫升
G&VS10019.5C    预备液（Reagent C）                毫升
G&VS10019.5D     染色液（Reagent D）            毫升

试剂盒订购信息
产品编号            名称                规格
G&VS10006.1    动物细胞/组织线粒体粗提分离试剂盒        10/50次
G&VS10006.2    动物细胞/组织活性线粒体分离试剂盒        10/50次
G&VS10006.3    动物细胞/组织高质纯化线粒体分离试剂盒        10次
G&VS10019.1    活体细胞线粒体形态/活性荧光染色试剂盒        100/200次
G&VS10019.2    植物组织线粒体形态/活性荧光染色试剂盒        20次
G&VS10019.3    真菌/酵母细胞线粒体形态/活性荧光染色试剂盒    100次
G&VS10019.4    纯化线粒体形态/活性荧光染色试剂盒        100次
G&VS10019.5    冰冻切片线粒体形态/活性荧光染色试剂盒        50次