CAT#:JW-5-715
常温运输及保存
3%(v/v)过氧化氢溶液
产品及特点
本产品是体积比为3%的过氧化氢溶液,过氧化氢又叫双氧水。它是一种强氧化剂。在免疫组化实验中可用于灭活内源性过氧化物酶,还可用于物体表面消毒。因其对金属具有一定的腐蚀性,故不可用于金属表面的消毒。也不可与碱性或氧化物进行混合。本产品仅应用于科研。
规格及成分
本产品使用塑料袋包装
成分 编号 规格 包装
3%(v/v)过氧化氢溶液 5-715 250 mL 250 mL本色瓶
使用手册 5-715sc 1份 无
运输及保存
常温运输及保存,有效期一年。
自备物品
免疫组化切片染色所需试剂及耗材。
使用方法
免疫组化切片染色及内源过氧化氢酶活性去除实验流程(此为参考流程,具体染色细节请参考文献):
1.切片脱蜡至水。
2.抗原修复,将片子浸没在抗原修复液中,高温修复20分钟。
3.冷却:浸泡在修复液中冷却,时间充裕可放在室温下慢慢冷却,也可直接在室温冷却10分钟后,用自来水流水冲洗冷却。注意:不可直接在自来水下冲洗冷却。
4.过氧化氢酶灭活:3%过氧化氢溶液中浸泡10分钟,去除内源性过氧化氢酶。
5.冲洗:清水冲洗,PBST清洗两次,摇床上3分钟/次。注意:摇床可以清洗的更干净。
6.封闭:封闭液(3%FBS或3%BSA或10%山羊血清)室温下封闭1小时。
7.冲洗:PBST清洗三次,摇床上3分钟/次。
8.抗体孵育:一抗,按照稀释比稀释,37℃烘箱湿盒中孵育1小时(最好不要超过1小时,不然背景会很强),PBST摇床
9.清洗3次,3分钟/次。二抗,按照稀释比稀释,37度烘箱湿盒中孵育30分钟。PBST摇床清洗3次,3分钟/次。
10.显色:1×DAB显色,仔细观察,棕色显现后立马用自来水终止反应。(若第一次显色强度不够,可以再次显色)
11.苏木精复染:苏木精染色1分钟,自来水冲洗,显微镜下观察,若不够可重复苏木精染色。
12.脱水:依次放入80%酒精,95%酒精,100%酒精,各2分钟。
13.无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶固定。
14.固定后镜检拍照。
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