细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书

主要用途
细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流式仪测定细胞中DNA结合碘化丙啶染料程度，来定量DNA含量，以进一步获取细胞周期分布状况的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞（动物、人体、植物、昆虫等）的细胞周期分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、细胞分裂、代谢等的研究。产品严格无菌，即到即用，分辨率高，操作简捷，性能稳定。

技术背景
细胞周期是评价细胞代谢、生理和病理状况的重要指标。通过DNA结合染料，借助细胞流式仪，测定出DNA含量，根据DNA含量随着细胞周期的不同而发生变化，来确定和区别细胞周期的不同阶段。流式细胞术（FLOW CYTOMETRY）是七十年代发展起来的集计算机、激光、流体力学、细胞化学、细胞免疫学为一体的高科学技术。凋亡细胞是在正常G0/G1峰细胞群前出现亚二倍体峰（sub－G1）细胞群。

产品内容
清理液（Reagent A）        毫升
固着液（Reagent B）        毫升
缓冲液（Reagent C）        毫升
染色液（Reagent D）    毫升
产品说明书        1份

保存方法
保存缓冲液（Reagent C）和染色液（Reagent D）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent D）避免光照，有效保证6月

用户自备
HANKS平衡盐溶液（G&VS12022）或PBS缓冲溶液（G&VS12033）：用于清洗细胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（G&VS12024）：用于细胞脱离
完全细胞培养液（G&VS12052）：用于中和胰蛋白酶的处理
15毫升锥形离心管：用于细胞收集的操作
1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器
（微型）台式离心机：用于细胞收集的操作
细胞流式仪：用于细胞荧光分析

实验步骤
实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂置入冰槽里融化。移出xx微升缓冲液（Reagent C）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升染色液（Reagent D）混匀后标记为染色工作液，置于暗室里，避免光照。然后进行下列操作。
1．准备1瓶25cm2细胞培养瓶的待测细胞，铺满率达70％（约1百万细胞数）
2．小心移出细胞培养液到15毫升锥形离心管（收集漂浮细胞）
3．加入2.5毫升用户自备的HANKS平衡盐溶液或PBS缓冲溶液到细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面
4．小心移出2.5毫升清洗液到上述15毫升锥形离心管
5．加入1毫升胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液到细胞培养瓶，铺满整个培养平面
6．置入37℃培养箱孵育1分种
7．振动培养瓶，使细胞脱落，然后加入5毫升用户自备的完全细胞培养液
8．移入到上述15毫升锥形离心管（悬浮细胞从这一步骤开始）
9．放进台式离心机离心5分钟，速度为300g
10．小心抽去上清液
11．加入xx毫升预冷的清理液（Reagent A）到15毫升锥形离心管，混匀
12．移入到1.5毫升离心管
13．放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为500g（或2000RPM，例如EPPENDORF 5415）
14．小心抽去上清液
15．加入xx毫升预冷的固着液（Reagent B），混匀
16．放进4℃冰箱里孵育16小时
17．放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为500g（或2000RPM，例如EPPENDORF 5415）
18．小心抽去固着液
19．加入xx微升染色工作液，用200微升枪头上下轻柔抽吸，混匀细胞颗粒群
20．在暗室里37℃培养箱里孵育45分钟
21．移入到细胞流式仪专用测试管（可放进4℃冰箱里待测）
22．即刻进行细胞流式仪分析：波长488nm氩离子激光出现红色荧光（或488nm激发波长，610nm散发波长），观察50000个细胞以上
 
注意事项
1．本产品为50次操作
2．确保实验准确性，须收集所有悬浮和贴壁细胞
3．可用35mm培养皿或6孔培养板，细胞总量不得少于30万
4．操作时，须戴手套
5．孵育时，必须避免光照
6．建议细胞染色完成后，即刻进行细胞流式仪分析。如果放进4℃冰箱里待测，不要超过1周
7．细胞流式仪分析前，须混匀内容物，避免细胞成团
8．细胞检测量不得少于10000个
9．告知流式仪技术员有关细胞类型
10．本公司提供系列细胞周期分析试剂产品
 
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定
2．本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺
上海极威生物科技有限公司秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
编号        名称                    规格        
G&VS10021.3    细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒    50次        
G&VS10021.3A    清理液（Reagent A）                500毫升
G&VS10021.3B    固着液（Reagent B）                500毫升
G&VS10021.3C     缓冲液（Reagent C）                100毫升
G&VS10021.3D     染色液（Reagent D）            10毫升
G&VS12022     HANKS平衡盐缓冲溶液            500毫升
G&VS12024    胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液            100毫升
G&VS12033    PBS缓冲溶液                500毫升
G&VS12052    DMEM完全细胞培养液            500毫升

产品编号        名称                规格
G&VS10021.1    通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒    100次
G&VS10021.2    细胞周期蓝色荧光流式细胞分析试剂盒（紫外波长，无需固定和透膜处理）    100次
G&VS10021.3    细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂盒    100次
G&VS10137.1    双参数细胞周期G0期流式细胞分析试剂盒    10次
G&VS10137.2    双参数细胞周期G1期流式细胞分析试剂盒    10次
G&VS10137.3    双参数细胞周期S期流式细胞分析试剂盒    10次
G&VS10137.4    双参数细胞周期G2期流式细胞分析试剂盒    10次
G&VS10137.5    双参数细胞周期M期流式细胞分析试剂盒    10次
G&VS10137.6    多参数细胞周期全周期流式细胞分析试剂盒    10次
G&VS10138.1    通用型动物细胞周期（G1/S和G2/M期）同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.2    动物细胞周期G0期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.3    动物细胞周期G1期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.4    动物细胞周期G1后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.5    动物细胞周期S早期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.6    动物细胞周期S期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.7    动物细胞周期S后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.8    动物细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10138.9    动物细胞周期M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.1    通用型植物样品细胞周期G1/S和G2/M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.2    植物细胞周期G0期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.3    植物细胞周期G1期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.4    植物细胞周期G1后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.5    植物细胞周期S早期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.6    植物细胞周期S期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.7    植物细胞周期S后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.8    植物细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10140.9    植物细胞周期M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.1    通用型酵母样品细胞周期G1/S和G2/M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.2    酵母细胞周期G0期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.3    酵母细胞周期G1期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.4    酵母细胞周期G1后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.5    酵母细胞周期S早期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.6    酵母细胞周期S期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.7    酵母细胞周期S后期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.8    酵母细胞周期G2期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10141.9    酵母细胞周期M期同步（SYNCHRONY）处理试剂盒    10次
G&VS10142    通用型细胞周期同步（SYNCHRONY）细胞流式分析试剂盒    20次