CAT#:JW-2-5014
低温运输,-80℃保存
E.coli大肠杆菌Rosetta-gami 2(DE3)甘油菌菌种
产品及特点
本菌株来源于Origami 2系列菌株,集合了Rosetta 2系列菌株和Origami 2系列菌株的优点,增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。本菌株基因型是D(ara-leu)7697, DlacX74, DphoA, PvuII, phoR, araD139, ahpC, galE, galK, rpsL, (DE3), F’[lac+ lacIq pro], gor522::Tn10, trxB, pRARE2(CamR, StrR, TetR)。它具有下列特点:
1.pRARE2补充了大肠杆菌缺乏的7种稀有密码子(AUA,AGG,AGA,CUA, CCC,GGA和CGG)对应的tRNA,能够提高外源基因的表达水平。
2.Gor和TrxB基因突变有利于形成高效正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。
3.整合了l噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),适合T7启动子诱导的蛋白表达。
4.不具有卡那霉素抗性,可用于具有卡那霉素抗性质粒的蛋白表达。
5.具有氯霉素,链霉素,四环素抗性,因此本菌株不能作为氯霉素,链霉素和四环素抗性质粒的宿主菌。
6.本产品含30%的甘油。
规格及成分
本产品使用塑料袋包装
成分 编号 规格 包装
大肠杆菌Rosetta-gami 2(DE3)
甘油菌菌种 2-5014 1 mL 2 mL菌种管
使用手册 2-5014sc 1份 无
运输及保存:低温运输,-80℃保种保存,有效期一年。
自备试剂:LB培养基(含50 mg/mL氯霉素)
使用方法
菌种的复活:
1.对-80℃保存的本产品
保存菌种复苏时,从冰箱中取出塑料冻存菌种管,立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动,直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启塑料冻存菌种管,取100~200 mL本产品,接种至3~5 mL新鲜LB培养基(含50 mg/mL氯霉素)中,过夜摇菌,然后制备质粒。
2.对液氮保存的本产品
保存菌种复苏与-80℃冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出塑料冻存菌种管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启塑料冻存菌种管,取100~200 mL本产品,接种至3~5 mL新鲜LB培养基(含50 mg/mL氯霉素)中,过夜摇菌,然后制备质粒。
关联产品:大肠杆菌Rosetta-gami B(DE3)甘油菌菌种