小鼠脑动脉平滑肌细胞

Cat No.:JW-J662

种属：小鼠
组织来源：正常主动脉组织
传代比例：1:2传代
完全培养基配置：基础培养基500ml ；生长添加剂5ml ；胎牛血清50ml ；双抗5ml
简介：血管疾病发生和发展的一个主要因素是由于血管平滑肌细胞（ smooth muscle cells, SMCs ）转变成为了具有繁殖能 力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道 ，ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表达可  能是造成血管壁炎症反应 ，并进一步造成血管疾病的原因。因此 ，对血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和   确定新的血管疾病的靶向治疗方法。
形态：长梭形细胞样、不规则细胞样
生长特征：贴壁生长
细胞检测：平滑肌肌动蛋白 ( α-SMA ）免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定 ，细胞纯度可达90%以上 ，不含有HIV-1、HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
倍增时间：每周 2 至 3 次
换液频率：2-3天换液一次
培养条件：气相 ：空气 ，95% ；二氧化碳 ，5%。 温度 ：37摄氏度 ，培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件：冻存液 ：90%FBS ，DMSO 10%,或使用非程序冻存液 ：官网货号JW-H040
产品使用：仅限于科学研究 ，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞接收处理流程 ：
1 ：观察有无破损漏液情况 ，如有请拍照及时联系客服。
2 ：酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态 ，观察拍照后不用打开培养瓶盖 放入培养箱静 止2-3小时稳定 细胞状态。
3 ：请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。
4 ：产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。
5 ：若产品有异常或其他疑问 ，可随时联系客服 ；转至技术支持。

常温细胞收货当天处理方式
1.收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2. 镜下观察有无微生物污染现象，拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象， 方便后续 售后处理。
3. 消毒后，更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代，请根据实际情况决定)，
首次传代推荐比例 1：2 到 1：3（按实际收货细胞密度决定，若不确定 可联系技术支持）；若细 胞密度不到 80%则可继续培养，注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖；悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。
5. 由于气温，运输等影响造成贴壁细胞漂浮的，请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 （参考附件），或及时联系技术支持进行指导传代。

贴壁细胞传代：
1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；
2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层，前后摇晃容器数次
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入预热的胰酶；胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml)；
4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟（请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异）；
5.在显微镜下观察细胞解离情况；如果解离程度未达 90%，可将孵育时间延长几分钟，每 30 秒 钟检查一次解离情况；
6.细胞解离程度大于等于 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流尽；加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基；吹打细胞层表面数次，使培养基分散；
7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟 （请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异）；
8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适
量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，把细胞放回培养箱（注：如果使用培养瓶，将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶
盖）。

悬浮细胞传代：
将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min，收集上清，加 1-   2ml 完全培养基重悬，按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中，补充5-8ml/瓶新的完全培养基 ， 最后放入细胞培养箱中培养。