人骨髓间充质干细胞说明书
Catalog：JW-CL-2124

一． 产品简介
1 、产品名称：人骨髓间充质干细胞
2 、组织来源：骨髓组织
3 、产品规格：25cm2 培养瓶/5×105cells
4、细胞简介：
人骨髓间充质干细胞（BMSC）分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位   于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制  造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各  种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是  造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨  髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产  生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随  着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁  平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造  血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，可以向骨、 软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化，因此可以作为组织工程中  的种子细胞。在骨髓中，BMSC 占骨髓有核细胞总数的 0.001%-0. 1% ，含量极   低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高，在培养过程中，受贴壁时间、 种植密度、血清含量、培养温度和培养基 pH 值等条件的影响。
本公司生产的人骨髓间充质干细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴 壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为 5×10^5cells/瓶；细胞经 CD34、 CD90 免疫荧光鉴定，纯度可达 90%以上，且不含有 HIV-1 、HBV 、HCV 、支  原体、细菌、酵母和真菌等。
5 、培养基信息：
培养基内容：MSCM 基础培养基、FBS 、 Penicillin、Streptomycin 等
我们推荐使用人骨髓间充质干细胞专用培养基（PYH094）作为体外培养 人骨髓间充质干细胞专用培养基。

二.细胞发货及鉴定图片
（1）细胞状态照片：细胞发货时发送至少3 张细胞发货前电子照片；
（2）细胞鉴定照片：若增加鉴定服务，提供 3 套鉴定照片；

三.使用方法
在极威技术部标准操作流程下，人骨髓间充质干细胞可传 3-5 代左右；
建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1 、取出 25cm2 培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入 37℃ , 5%CO2 细胞 培养箱中静置 3-4h ，以稳定细胞状态；
2 、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养；
3 、细胞传代
1） 吸出 25cm2 培养瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次；
2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，37℃温浴 3min 左右；倒置 显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3） 用吸管轻轻吹打混匀，按 1 ：2 适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的 完全培养基至 5ml ，放入 37℃ , 5%CO2 细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔 2-3 天更换新鲜的完全培养基。

四．售后注意事项
1.    培养基于4℃条件下可保存3-6个月；
2.    在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；
3.    细胞从收货之日起（若冻存细胞，复苏3日内，收到请尽快复苏），出现 任何问题，请提供相应的图片，免费重发；
4.    若重发后，细胞除下述四种情况外，再免费重发，其他情况不予免费重  发，若需要二次购买，按照市场价的65折优惠，若需要三次购买，按照  市场价的5折优惠。若仍出现问题，建议客户把细胞相关实验委托我方完 成，不再收取细胞共享费用。
l 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液漏 液等，重发；
l 细胞污染问题，给我们提出真实的实验图片和结果，重发 ；
l 冻存的细胞复苏后或常温细胞静置后，绝大多数细胞未存活（提 供清晰的细胞照片），重发；
l 存活细胞，静置24小时后，绝大多数细胞未存活，重发；
5.    人源细胞（STR）或大小鼠细胞系（种属鉴定）鉴定结果存在争议，可以 在收到细胞3个月内提供真实有效的检测证明，本公司承诺无条件退还细 胞款项以及产生鉴定费用。
6.    客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以联系技术售后，我们随时 给予解答。
7.    售后需要提供资料：收到时整体培养瓶拍照、静置后细胞照片、3日内细 胞照片等；图片尽量清晰。

温馨提示：
l 客户收到细胞后请务必仔细阅读细胞注意事项，确保细胞的培养 条件一致；
l 台盼蓝染色法鉴定细胞活力；
l 细胞培养瓶中的培养液约为100ml ，收到细胞后，把培养方瓶里 的培养基收集放置于4℃备用（路上运输培养基营养会有所损耗 建议使用时补加2%血清，待细胞状态恢复后，培养液一半用瓶内 的，一半用户自备的，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应 而造成生长状态不佳。）

由于使用所用试剂、操作环境、操作手法不同，以上仅供各实验室参考！