正苯基萘胺摄入法细菌膜损伤荧光检测试剂盒产品说明书

主要用途
正苯基萘胺摄入法细菌膜损伤荧光检测试剂是一种旨在通过使用疏水荧光染料正苯基萘胺，与膜磷脂成分  结合，产生强烈蓝色荧光，作为检测信号来测定细菌细胞膜损伤程度的权威而经典的技术方法。该技术由  大师级科学家精心改良、成功实验证明的。适用于革兰氏阴性和阳性细菌的膜完整性检测。产品严格无菌， 即到即用，性能稳定，荧光清晰。
技术背景
正苯基萘胺（1-N-phenyl-naphtylamine；NPN）是一种疏水性（hydrophobic）荧光探针，在磷脂环境下，而 不是在水相环境下，产生强烈蓝色荧光。完整的细菌细胞外膜对正苯基萘胺发生排斥，一旦膜遭到损害， 正苯基萘胺可以进入膜磷脂层，而显示荧光增强现象，其产生的蓝色荧光基团的吸收峰是 355nm ，而散射 峰是 460nm ，成为一种常用的荧光检测信号，以此来评价细菌膜损伤程度。

产品内容
缓冲液（Reagent A）            毫升
染色液（Reagent B）            微升
产品说明书                            1 份

保存方式
保存在－20℃冰箱里，染色液（Reagent B）避免光照，有效保证 6 月

用户自备
微型台式离心机：用于细菌沉淀收集
1.5 毫升离心管：用于样品处理的容器
比色皿或 96 孔板：用于样品荧光检测的容器
荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于细菌染色后分析

实验步骤
实验开始前，开启荧光分光光度仪预热，设定激发波长 355nm ，散发波长 460nm 。然后进行下列操作：
1 ． 移取 1 毫升细菌培养瓶里的新鲜菌液（OD600 ＝0.50）到新的 1.5 毫升离心管
2 ． 放进微型台式离心机离心 1 分钟，速度为 16000g  （或 13000RPM ，例如 eppendorf 5415）
3 ． 小心抽去上清液
4 ． 加入 xx 毫升缓冲液（Reagent A），充分混匀
5 ． 放进微型台式离心机离心 1 分钟，速度为 16000g  （或 13000RPM ，例如 eppendorf 5415）
6 ． 小心抽去上清液
7 ． 重复实验步骤 4 至 6 一次
8 ． 加入 xx 毫升缓冲液（Reagent A），充分混匀
9 ． 小心移取 150 微升菌液到比色皿或 96 孔板的样品孔里
10 ．加入 45 微升用户自备的药物
11．加入 xx 微升染色液（Reagent B），混匀
12 ．置于 25℃温度下孵育 5 分钟
13 ．即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪：激发波长 355nm ，散发波长 460nm
14 ．获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit）
15 ．构建损伤曲线：纵座标（Y 轴）为相对荧光单位；横座标（X 轴）为药物浓度
16 ．或比较不同细菌的膜损伤程度

注意事项
1 ． 本产品为 20 次操作
2 ． 操作时，须戴手套
3 ． 样品须使用缓冲液（Reagent A）清理处理
4 ． 用户自备的药物，避免使用盐类溶液配制
5 ． 通常样品染色后 2 至 5 分钟趋于饱和
6 ． 建议细菌染色后即刻进行荧光分析
7 ． 本公司提供系列细菌分析试剂产品

质量标准
1 ． 本产品经鉴定性能稳定
2 ． 本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后， 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告） 与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。

订购信息
单组份订购信息
编号        名称                    规格
G&VS60045.2    正苯基萘胺摄入法细菌膜损伤荧光检测试剂盒    20 次
G&VS60045.2A    缓冲液（Reagent A）                毫升
G&VS60045.2B    染色液（Reagent B）                毫升

试剂盒订购信息

产品编号        名称                    规格
G&VS60003. 1    细菌β-半乳糖苷酶活性原位染色试剂盒        40 次
G&VS60003.2    细菌β-半乳糖苷酶活性化学发光法定量检测试剂盒    20 次
G&VS60003.3    细菌β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒    20 次
G&VS60026. 1. 1    革兰氏阳性细菌基因组 DNA 纯化试剂盒        20 次
G&VS60026. 1.2    链霉菌属基因组 DNA 纯化试剂盒            20 次
G&VS60026.2    革兰氏阴性细菌基因组 DNA 纯化试剂盒        20 次
G&VS60038    细菌尼罗红染色试剂盒            100 次
G&VS60040    细菌活力蓝色荧光（DAPI）检测试剂盒        50 次
G&VS60041. 1    活力－死亡细菌双重荧光检测试剂盒        50 次
G&VS60045. 1    半乳糖苷酶释放法细菌膜损伤荧光检测试剂盒    20 次
G&VS60045.2    正苯基萘胺摄入法细菌膜损伤荧光检测试剂盒    20 次
G&VS12001    细菌冻存培养基                100 毫升
G&VS12002    特殊细菌营养基                100 毫升
G&VS60016    细菌菌落直接 PCR 检测法            100 次
G&VS12056    裂解液VII：细菌裂解溶液            50 次
G&VS12060    裂解液VIII：细菌活性化蛋白制备溶液        20 次
G&VS12032    细菌－蛋白酶抑制剂混合溶液            100 微升
G&VS60046    细菌 ATP 生物发光法定量检测试剂盒        50 次
G&VS30022. 1    细菌可溶性总蛋白制备试剂盒            20 次
G&VS30022.2    可溶性细菌膜蛋白制备试剂盒            20 次