细胞总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒产品说明书

主要用途
细胞总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂是一种旨在通过荧光染料菲律宾（FILIPIN）特异性与 胆固醇结合，形成复合体，并产生蓝色荧光现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实 验证明的。主要适用于各种细胞（动物、人体等）或培养细胞中游离胆固醇分布的检测。广泛用于细胞病 理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。

技术背景
胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene） 的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为 cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结  合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢  以及激素合成中起着重要作用 。菲律宾（FILIPIN）是一类由四种同分异构体的多烯抗生素（polyene   antibiotics）或多马霉素（polyene macrolide）的总称。源自于 S. FILIPINENSIS 细菌的培养液中。其分子式  为 C35H58O11 ，分子量为 654.8 。菲律宾与游离胆固醇结合形成聚集体或复合物。

产品内容    
清理液（Reagent A）        毫升
固着液（Reagent B）        毫升
抗干扰液（Reagent C）    毫升
染色液（Reagent D）    毫升
产品说明书        1 份

保存方式    
保存染色液（Reagent D）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在 4℃冰箱里；有效保证 6 月

用户自备
荧光显微镜：用于样品染色后观察分析

实验步骤
一、 样本固着处理
1 ． 准备 1 个 48 孔细胞培养板的细胞或载波片的细胞
2 ． 小心抽去 48 孔细胞培养板里的培养液
3 ． 小心加入 xx 微升清理液（Reagent A），铺满整个样品表面
4 ． 小心移去清理液（Reagent A）
5 ． 重复实验步骤 3 至 4 二次
6 ． 小心加入 xx 微升固着液（Reagent B），铺满整个样品表面
7 ． 室温下孵育30 分钟
8 ． 小心移去固着液（Reagent B）
9 ． 小心加入 xx 微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
10 ．小心移去清理液（Reagent A）
11．重复实验步骤 9 至 10 二次

二、样本染色处理
1 ． 小心加入 xx 微升抗干扰液（Reagent C），铺满整个样品表面
2 ． 室温下孵育 10 分钟
3 ． 小心移去抗干扰液（Reagent C）
4 ． 小心加入 xx 微升染色液（Reagent D），铺满整个样品表面
5 ． 室温下孵育30 分钟，避免光照
6 ． 小心移去染色液（Reagent D）
7 ． 小心加入 xx 微升清理液（Reagent A），清洗样品表面
8 ． 小心移去清理液（Reagent A）
9 ． 重复实验步骤 7 至 8 二次
10 ．小心加入 xx 微升清理液（Reagent A）
11．即刻在荧光显微镜下观察：激发波长：340nm；散发波长：430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

注意事项
1 ． 本产品为 50 次（48 孔细胞培养板）操作
2 ． 操作时，须戴手套
3 ． 操作时，避免污染母液
4 ． 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面
5 ． 样品染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察
6 ． 荧光容易受到光漂白（photobleach），建议使用抗淬灭剂Ⅰ-12058.2
7 ． 本产品使用载玻片细胞染色后，可用于电镜分析
8 ． 本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm 培养皿，和各种培养孔板，须相应 调整处理液：

操作容器        建议处理液规格
载玻片        100 微升
载玻片培养皿    1 毫升
35mm 培养皿    1 毫升
96 孔培养板    100 微升
48 孔培养板    200 微升
24 孔培养板    500 微升
12 孔培养板    1 毫升
6 孔培养板        2 毫升
25cm2 细胞培养瓶    3 毫升

9 ． 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

质量标准
1 ． 本产品经鉴定性能稳定
2 ． 本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺
极威生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后， 应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证 说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告） 与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作 所致，本公司不承担由此造成的损失。

友情提醒
IF IT DOESN’T WORK ， RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。


订购信息

单组份订购信息
编号                         名称                                                             规格
G&VS80059. 1    细胞总游离胆固醇菲律宾荧光染色试剂盒         50 次
G&VS80059. 1A     清理液（Reagent A）                毫升
G&VS80059. 1B     固着液（Reagent B）             毫升
G&VS80059. 1C     抗干扰液（Reagent C）            毫升
G&VS80059. 1D      染色液（Reagent D）              毫升
G&VS12058.2    抗淬灭剂Ⅰ                毫升

试剂盒订购信息
产品编号        名称                            规格
G&VS80059.1    细胞总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒            50 次
G&VS80059.2. 1    特殊石蜡切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光间接染色试剂盒        10 次
G&VS80059.2.2    特殊石蜡切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光直接染色试剂盒        50 次
G&VS80059.3    冰冻切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒        50 次
G&VS80079.1    细胞总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒        20 次
G&VS80079.2. 1    特殊石蜡切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光间接染色试剂盒    10 次
G&VS80079.2.2    特殊石蜡切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光直接染色试剂盒    20 次
G&VS80079.3    冰冻切片总胆固醇（酯酶法）菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂盒        20 次