人食管癌细胞ECA109

种属    人
别称    Eca109; Eca 109; EC-109; EC109
组织来源    食管
疾病    食管鳞状细胞癌
传代比例/细胞消化    1:2传代 ，消化2-3分钟
完全培养基配置    RPMI1640培养基；10% 胎牛血清；1%双抗
简介    1973年建系 ，来自人食管中段鳞癌组织 ，小块法原代培养建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。
形态    上皮细胞样
生长特征    贴壁生长
倍增时间    每周 2 至 3 次
STR    Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：11；D16S539：12；D18S51：12 ，16；D19S433 ：13；
D21S11：30；D2S1338：17 ，20；D3S1358：17；D5S818：12；D7S820：8 ，12；D8S1179：13 ，14；
FGA：25；TH01：9；TPOX：8；vWA：16 ，17；
培养条件    气相：空气 ，95% ；二氧化碳 ，5%。 温度：37摄氏度 ，培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件    冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液
产品使用    仅限于科学研究 ，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞接收处理流程：
1：观察有无破损漏液情况，如有请拍照及时联系客服。
2：酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态，观察拍照后不用打开培养瓶盖 放入培养箱静 止2-3小时稳定 细胞状态。
3：请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。
4：若产品有异常或其他疑问，可随时联系客服；转至技术支持。

常温细胞收货当天处理方式
1.收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2. 镜下观察有无微生物污染现象，拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象， 方便后续
售后处理。
3. 消毒后，更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。
4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代，请根据实际情况决定)，
首次传代推荐比例 1：2 到 1：3（按实际收货细胞密度决定，若不确定 可联系技术支持）；若细 胞密度不到 80%则可继续培养，注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖；悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。
5. 由于气温，运输等影响造成贴壁细胞漂浮的，请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 （参考附件），或及时联系技术支持进行指导传代。
半贴壁半悬浮细胞处理： 6.该细胞是半贴壁半悬浮生长,悬浮细胞可用离心管收集细胞悬液后，
1000rpm 离心 5min，离心收集上清 7.当细胞密度在80%以下，将收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用   入 5ml 完全培养基重悬，加入回到原培养瓶中继续培养，若细胞生长80%以上对细胞进行传代，传  代时需要将悬浮细胞和贴壁细胞的沉淀用 1-2ml 完全培养基重悬收集到一起，混匀后按1：2比例接 种到新的培养瓶。半贴壁半悬浮细胞传代： 8.贴壁细胞可用PBS润洗后，在培养瓶中加入1~2毫升
0.25 % 胰蛋白酶溶液（含EDTA）置于37℃培养箱中消化，待细胞变圆收缩后可用5mL左右完全培养  基进行终止消化，然后轻轻吹散细胞后离心搜集细胞； 9.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细
胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬  液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加5-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生   长活力，放入培养箱培养。
贴壁细胞传代：1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；
2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层，前后摇晃容器数次
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入预热的胰酶；胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml)；
4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟（请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异）； 5.在显微镜下观察细胞解离情况；如果解离程度未达 90%，可将孵育时间延长几分钟，每 30 秒 钟检查一次解离情况；
6.细胞解离程度大于等于 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流尽；加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基；吹打细胞层表面数次，使培养基分散；
7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟 （请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异）；
8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适
量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，把细胞放回培养箱（注：如果使用培养瓶，将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶
盖）。
悬浮细胞传代：将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min，收集上清，加 1-   2ml 完全培养基重悬，按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中，补充5-8ml/瓶新的完全培养基 ， 最后放入细胞培养箱中培养。