MDA-PCA-2B 人前列腺癌细胞


Catalogue No.:JW- C1292
Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁
Complete Growth Medium:  H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application:  Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components
Item                     Specifications
a T25 flask                  2X106
Manual                         1 copy

Operation steps for cell culture

1. 吸走多余培养基，加入 3-5mL PBS 后轻轻晃动培养瓶润洗细胞；
2. 吸干净 PBS 后加入 1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表 面，培养瓶放 37 度培养箱消化；
（细胞对于消化比较敏感，消化过度会严重影响细胞状态，导致细胞传代死亡漂浮或 者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落，可以轻轻吹下时即可终止，禁止 消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔，不要吹出大量气泡。）
3. 加入6-8ml完全培养基终止消化，轻轻吹下细胞混匀；
4. 将混匀的细胞 1000rpm（约 150g）离心 3min，弃上清，再用新鲜培养基重悬 37 度培养箱继续培养(建议 T25 瓶加 10-12ml 完全培养基，10cm 皿加 12-15ml)；
传代比例: 不同细胞生长速度不一，具体传代比例视细胞生长速度而定，大部分细胞适用 1:3-1:4 传代，生长较慢的细胞可以 1:2 传代。

Cell cryopreservation
1.冻存液：92%完全培养基+8%DMSO（可以根据实验室条件自行选择）
2.降温步骤：4 度 10min，-20 度 2h，-80 过夜后液氮保存。

Tips：
1.   细胞经过运输后 ，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片 ，是正常现象。贴壁细胞 可以消化 ，悬浮细胞直接混匀收集细胞 ，900-1000rpm(约 150g)离心 3min ，弃上清。加 5ml   PBS 重悬细胞 ，再 900-1000rpm(约 150g)离心 3min ，用新鲜的完全培养基重悬接种到新的培  养瓶。第二次 PBS 重悬是为了去除碎片 ，如果平时碎片比较少 ，传代时可以省略 PBS 重悬的步  骤；如果碎片很多 ，建议 PBS 多洗几次。
2.   细胞生长不均时 ，可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。
3.   细胞生长缓慢时 ，可以选择提高血清浓度培养（最高不超过 20%） ，也可以根据细胞生长状态，选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。
4.   不同细胞贴壁性差异比较大 ，所以消化时间差别较大 ，20s-10min 均有可能 ，具体以细胞消化到 相互分离但未脱落 ，并可以轻轻吹下为准 ，严禁消化到细胞完全漂浮。客户消化过度导致细胞死  亡、漂浮、生长缓慢 ，不提供免费售后服务。
5.   干冰发货均为两支 ，客户先复苏一支 ，若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳 ，我方不提供免费售后服务。
6.   细胞状态正常时，应尽快冻存细胞保种 ，冻存后应随机抽取一支检测冻存效果。我方不对客户冻存细胞导致死亡负责 ，客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务。
7.    建议使用本库原装培养体系培养细胞 ，其他品牌培养基及血清培养效果无法保证，培养出现异常不予售后。

Notice：
客户收到细胞有任何疑问请及时致电我们 ，细胞收到后 1 周内没有任何电话 ，或其他形式回访 ， 默认为细胞质量没问题，之后出了任何问题不给予免费售后。细胞免费售后只提供一次 ，若重发后再 次培养死亡不再免费补发 ，细胞收货时已经死亡或密度不足的除外。