TCMK-1 细胞说明书

产品信息
细胞名称：小鼠肾小管上皮细胞；TCMK-1
细胞别称：TCMK1; Transformed C3H Mouse Kidney-1
产品货号：JW1286
产品规格：1×106cells/T25 培养瓶
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
培养体系：MEM＋10% FBS＋1% P/S
传代比例：1:2~1:3
消化时间：2-3min
冻存条件：无血清细胞冻存液（科研级）
培养环境：气相：空气，95% ；二氧化碳，5% 。温度：37℃。
注意事项：收集细胞瓶中完全培养基做过渡对比培养

常温细胞收货后处理方法
1.收到细胞后，首先观察培养瓶是否完好，若发现培养瓶有破裂，培养基外溢、浑浊等现象， 请及时拍照并与我们联系。
2.用 75%酒精对培养瓶表面进行消毒处理，将培养瓶置于细胞培养箱中静置培养 2~4 h ， 以 恢复细胞状态。
3.静置完成后，取出培养瓶，显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存 （40× , 100× ,200×各一张）前三天照片为重要售后依据。如发现细胞异常请及时与我们联系， 如果细胞签收三天内未与我们联系，则默认为收货良好。
4.若细胞密度超过80%，则可以根据提供的细胞培养步骤进行传代或冻存；若细胞密度未达到 80%，收集瓶中完全培养基，留 6mL 培养基，放入细胞培养箱中继续培养。

冻存细胞收货后处理方法
1.收到细胞后，首先观察泡沫箱中干冰是否有剩余，冻存管是否完好，是否有解冻情况，若 发现干冰完全汽化或冻存管有解冻现象，请及时拍照并与我们联系。如果细胞签收三天内 未与我们联系，则默认为收货良好。
2.复苏第一管如有活性、状态问题及时与我们联系，会有技术人员与您沟通指导后再复苏第 二管。
特别说明：未与我方联系，擅自复苏第二管出现问题不予售后。

细胞培养步骤
1.复苏细胞：从液氮灌中或-80℃冰箱中查找到需要复苏的细胞，水浴锅提前打开预热 37℃。
1)将查找到的冻存细胞在 37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2)将冻存管中的细胞移至含 5ml  完全培养基的离心管中，1000rpm  离心 5min；
3)弃去上清液，补加 4-6mL 完全培养基后吹匀，接种于 T25 培养瓶中（或 6cm 皿中）， 培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。
2.细胞传代：如果细胞密度达 80%-90% ，即可进行传代培养。
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次；
2)加 1-2mL 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消 化 2-3min ，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回 操作台，轻敲几下培养瓶后，加 5ml 以上含 10%血清的完全培养基终止消化；
3)轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，1000rpm 离心 5-8min ，弃去上清液，补 加 1-2mL 完全培养基后吹匀；
4)按 5-6mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全 培养基的培养皿中或者培养瓶中。
（即 1 个 T25 传代接种至 2~3 个 T25 或者 2~3 个直径为 6cm 的培养皿）
3.细胞冻存：细胞收集参照传代步骤 1~2 ，按冻存数量加入无血清冻存液后直接放-80℃冰箱 过夜，后续可转入液氮罐中长期保存。

关于细胞株售后服务
一、细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？
1.    细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；
2.    细胞污染问题，请在收到产品48 小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；
3.    常温发货的细胞静置 24 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后 24 小时后，绝大多数细胞未 存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；
4.    干冰冻存发货的细胞复苏后 24 小时后或常温发货的细胞静置 4 小时候并且未开封，出现污 染，重发；
5.    细胞活性问题，请在收到产品 7 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细 胞活力，核实后予重发；
6.    细胞收到当天以及第 2 、3 天请拍照，3 天未告知的，视为产品合格。4-7 天内出现问题有 提供收到细胞前 3 天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技 术人员沟通的， 由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由 双方进行协商处理或者按合同价的 50%收费重发。
二、细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
1.     客户造成细胞污染，不重发；
2.     客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
3.     非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
4.     细胞状态不好，未提供细胞培养前 3 天照片的，不重发；
5.     细胞培养时经其它处理的，不重发；
6.     细胞收到 2 天内，未告知，不重发；
7.    视具体情况而定。